透明質(zhì)酸酶的作用和重要性 

透明質(zhì)酸酶（Hyaluronidase，HAase） 是廣泛分布于自然界中的一類糖苷酶，通過(guò)作用于 β-1，3或 β-1，4 糖苷鍵來(lái)降解透明質(zhì)酸（Hyaluronic acid，HA）（圖 1）。[1]透明質(zhì)酸酶參與了機(jī)體內(nèi)受精過(guò)程、新生血管生成、炎癥反應(yīng)、創(chuàng)傷修復(fù)、細(xì)菌致病和毒素?cái)U(kuò)散等生理反應(yīng)，因此廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域，例如，整形、外科手術(shù)、眼科、內(nèi)科、腫瘤治療、皮膚科及婦科等。

圖1 透明質(zhì)酸結(jié)構(gòu)

隨著科技的不斷進(jìn)步，輔助生殖技術(shù)為許多不孕不育夫婦帶來(lái)了新的生育希望。在而這個(gè)領(lǐng)域，透明質(zhì)酸酶在促進(jìn)受孕過(guò)程中起著重要作用。高濃度皮下給藥,重組人透明質(zhì)酸酶-注射

透明質(zhì)酸酶在輔助生殖中的應(yīng)用 

在輔助生殖的體外受精領(lǐng)域，卵胞漿內(nèi)單精子注射（ICSI）曾經(jīng)是體外受精（IVF）失敗的補(bǔ)救手段，但經(jīng)過(guò)多年發(fā)展ICSI在不孕不育治療領(lǐng)域中已占具舉足輕重的地位。ICSI技術(shù)的出現(xiàn)，為很多不孕不育家庭帶來(lái)了新的生育希望。

ICSI是一種高度技術(shù)化的體外受精技術(shù)。其工作原理是在顯微鏡下，通過(guò)精細(xì)的操作，將單個(gè)精子直接注射入卵子的胞漿中，實(shí)現(xiàn)受精。（如圖2）ICSI整個(gè)操作流程包括托顆粒細(xì)胞、精子制動(dòng)、顯微注射以及胚胎培養(yǎng)四個(gè)步驟。（如圖3）在ICSI技術(shù)中，卵子必須從其周圍的卵丘細(xì)胞/顆粒細(xì)胞中分離以便觀察卵子的成熟和質(zhì)量。顆粒細(xì)胞主要分散在粘稠的透明質(zhì)酸中，而含透明質(zhì)酸酶的顆粒細(xì)胞去除液可將透明質(zhì)酸(即保持卵丘細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)的粘多糖)的己糖胺鍵水解，從而實(shí)現(xiàn)顆粒細(xì)胞從卵母細(xì)胞上分離，得到可用于卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射的卵母細(xì)胞，以便實(shí)施單精子注射技術(shù)。[2]

圖2 ICSI卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射技術(shù)（圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)，侵刪）

圖3 ICSI操作流程

重組人透明質(zhì)酸酶在輔助生殖領(lǐng)域的應(yīng)用優(yōu)勢(shì) 

在ICSI技術(shù)中，卵母細(xì)胞退化是常見(jiàn)的現(xiàn)象，退化可能會(huì)在注射針撤出后立即發(fā)生，表現(xiàn)為卵母細(xì)胞的突然破裂和胞質(zhì)的泄漏。目前一些干預(yù)措施已經(jīng)被提出來(lái)減少卵母細(xì)胞退化。如使用更小的內(nèi)徑和更長(zhǎng)的錐度的注射移液管可以顯著降低ICSI后的退變發(fā)生率；降低透明質(zhì)酸酶的濃度和暴露時(shí)間的長(zhǎng)度也能降低其對(duì)卵母細(xì)胞可能產(chǎn)生的毒性作用。

除此之外，有研究表明使用重組人透明質(zhì)酸酶去除卵冠-卵母細(xì)胞復(fù)合物時(shí)更加安全有效，并能顯著提高受精率，降低卵母細(xì)胞損傷。[3]從數(shù)據(jù)中我們可以發(fā)現(xiàn)，使用重組人透明質(zhì)酸酶能夠?qū)⒛讣?xì)胞損傷率降低至3.08%，同時(shí)將受精率提高至73.44%。（如圖4）[3]

 圖4 使用牛源透明質(zhì)酸酶(2005a)或重組人透明質(zhì)酸酶(2006b)的卵母細(xì)胞損傷率和正常受精率

傳統(tǒng)動(dòng)物來(lái)源的透明質(zhì)酸酶制劑，缺乏純度(<10%)，因此在臨床應(yīng)用中引起了許多風(fēng)險(xiǎn)，主要包括動(dòng)物源性病原體或污染物的傳播風(fēng)險(xiǎn)、批次間一致性以及對(duì)卵母細(xì)胞質(zhì)量的影響。而重組人透明質(zhì)酸酶是一種更安全、更有效的制劑，沒(méi)有病毒和其他病原體傳播的風(fēng)險(xiǎn)，而且具有一致的活性。[3]重組人透明質(zhì)酸酶-藥用輔料

展望未來(lái) 

中國(guó)政府對(duì)輔助生殖技術(shù)的支持在逐漸增強(qiáng)，相關(guān)政策也在不斷完善和細(xì)化。2020年3月27日，國(guó)家藥監(jiān)局發(fā)布的第一批醫(yī)療器械產(chǎn)品分類界定結(jié)果匯總中將顆粒細(xì)胞去除液作為三類醫(yī)療器械監(jiān)管，并對(duì)顆粒細(xì)胞去除液的成分與用途進(jìn)行了明確的定義與描述。（如圖4）[4]預(yù)計(jì)在未來(lái)幾年，隨著科技的進(jìn)步和生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展，輔助生殖技術(shù)的應(yīng)用范圍可能會(huì)進(jìn)一步擴(kuò)大，體外受精-胚胎移植技術(shù)也能更加完善和普及，造福更多有需要的人們。

圖4 2020年第一批醫(yī)療器械產(chǎn)品分類界定結(jié)果匯總

AVT現(xiàn)推出重組人透明質(zhì)酸酶/玻璃酸酶，該產(chǎn)品采用重組DNA技術(shù)，經(jīng)過(guò)外源表達(dá)及純化獲得。避免了動(dòng)物源性產(chǎn)品存在的過(guò)敏、病毒污染等潛在風(fēng)險(xiǎn)。

【產(chǎn)品名稱】

重組人透明質(zhì)酸酶/玻璃酸酶

Halozyme,hylenex

重組人透明質(zhì)酸酶-登記號(hào)

【產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)】

高純度；

高效價(jià)；

高穩(wěn)定性：每批產(chǎn)品都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制，嚴(yán)控批間差異；

無(wú)動(dòng)物源性污染：重組生產(chǎn)，非動(dòng)物來(lái)源，無(wú)外源性病毒污染。

參考文獻(xiàn)

[1]蘇康,吉愛(ài)國(guó).透明質(zhì)酸酶的研究進(jìn)展[J].生物技術(shù)通報(bào), 2014(3):7.

[2]夏旭升,于躍龍,尹航,等.一種用于人類輔助生殖的顆粒細(xì)胞去除液及其制備方法:CN202010471551.1[P].CN111471639A[2024-04-02].

[3] Franklin T C .Human recombinant hyaluronidase (Cumulase?) improves intracytoplasmic sperm injection survival and fertilization rates[J].Reproductive BioMedicine Online, 2009.DOI:10.1016/S1472-6483(10)60030-2.

[4] 中國(guó)食品藥品檢定研究所. 2020年第一批醫(yī)療器械產(chǎn)品分類界定結(jié)果匯總[N].https://www.nifdc.org.cn/nifdc/bshff/ylqxbzhgl/qxxxgk/fljd/20200327160800941.html, 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械標(biāo)準(zhǔn)管理中心.2020.03.07.